MD学习切片肾

肾纤维化是一个严重的临床问题，导致最需要肾脏替代治疗。没有足够的预防或治疗方法可用于临床上专门针对肾纤维化。因此，有必要寻找新的有效治疗策略。尽管使用同质细胞群的体外模型有助于理解肾纤维化的发病机制，但这些模型很难模拟复杂的体内环境。因此，在此评估了精确切割肾切片 (PCKS) 模型作为一种新的多细胞离体模型，以研究纤维化的发展及其使用抗纤维化化合物的预防。使用 Krumdieck 组织切片机从健康的 C57BL/6 小鼠肾脏制备精确切割的切片（200-300 μm 厚度）。为了诱导模拟纤维化过程的变化，在存在或不存在抗纤维化细胞因子 IFNγ（1 μg/ml）或靶向 PDGFRβ（PPB- PEG-IFNγ)。培养后，使用实时 PCR 和免疫组织化学测定组织活力（ATP 含量）和 α-SMA、纤连蛋白、胶原蛋白 I 和胶原蛋白 III 的表达。切片在孵育 72 h 后仍保持活力，并且未观察到 TGFβ1 和 IFNγ 对活力的显著影响。 TGFβ1 显著增加 α-SMA、纤连蛋白和胶原蛋白 I mRNA 和蛋白质表达水平。 IFNγ 和 PPB-PEG-IFNγ 显著降低了 TGFβ1 诱导的纤连蛋白、胶原蛋白 I 和胶原蛋白 III mRNA 表达，这已通过免疫组织化学证实。 PKCS 模型是一种新工具，用于测试纤维化的病理生理学，并在多细胞和促纤维化环境中筛选抗纤维化药物离体的功效。切片模型的一个主要优点是它不仅可以用于动物，还可以用于（纤维化）人体肾脏组织。